mdbioproducts常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用程序的故障排除

一般實(shí)驗(yàn)室技術(shù)

洗滌技巧：

多通道移液器或噴瓶  

確保移液器的每個(gè)尖頭都正確分配或噴射瓶有足夠的壓力。清空孔中的內(nèi)容物并用指示的洗滌緩沖液體積填充孔。倒出孔，倒置并在干凈的紙巾上吸干。如插入所示重復(fù)此過(guò)程。最后一次傾析后，倒置去除任何剩余的洗滌緩沖液，并將其吸干在干凈的紙巾上。不要讓孔靜置，按照插圖中的指示進(jìn)行下一步。注意：如果在傾析時(shí)條帶變得松散，則在清洗和在干凈的水槽中潷析之前對(duì)條帶進(jìn)行編號(hào)非常有用。

歧管分配器或自動(dòng)清洗機(jī)

確保有適當(dāng)?shù)恼婵展?yīng)。檢查所有插管或插腳是否正確分配和抽吸。通過(guò)抽吸或傾析清空孔。將每個(gè)孔填充到插入物中指示的適當(dāng)體積。*吸出孔。去除緩沖液后，讓抽吸裝置留在孔中，不要過(guò)度抽吸孔。如插入物所示重復(fù)此過(guò)程，不要讓孔在最后一次抽吸后保持干燥。

移液技術(shù)：

確保您使用的移液器已校準(zhǔn)，并且移液器吸頭正確且牢固地固定在移液器上。將移液器設(shè)置到所需的體積并用樣品或試劑預(yù)沖洗。緩慢向上吸取試劑，使移液器緩慢返回向上位置。稍等片刻，讓試劑在吸頭中達(dá)到體積平衡。將試劑緩慢分配到第一次停止，然后輕輕分配到第二次停止。將移液器保持在此位置，直到將其從儲(chǔ)液器或孔中取出，以避免將試劑吸回。當(dāng)您取下移液器時(shí)，將吸頭向上拉到容器或孔的一側(cè)，以釋放可能在吸頭外側(cè)的任何液體。

ELISA 故障排除

許多因素會(huì)影響 ELISA 的性能。

• 在開(kāi)始之前仔細(xì)閱讀說(shuō)明。這將有助于避免不必要的錯(cuò)誤。
• 使用良好的實(shí)驗(yàn)室規(guī)范和校準(zhǔn)設(shè)備。
• 使用干凈的容器和干凈的實(shí)驗(yàn)室空間，并在每種試劑之間更換移液器吸頭。
• 重復(fù)運(yùn)行所有標(biāo)準(zhǔn)和樣品，因?yàn)檫@將提高準(zhǔn)確性。

精度差：

• 清洗不*：確保儀器工作正常，并且抽吸后孔看起來(lái)是干的。
• 試劑混合不均：確保試劑充分混合。
• 污染：確保使用干凈的容器并在每種試劑之間更換移液器吸頭。
• 移液錯(cuò)誤：使用良好的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)并確保正確校準(zhǔn)移液器。

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)：

• 標(biāo)準(zhǔn)品制備不當(dāng)：確保正確配制標(biāo)準(zhǔn)品并遵守稀釋說(shuō)明。
• 清洗不*：確保儀器工作正常，并且抽吸后孔看起來(lái)是干的。
• 添加到孔中的體積不等：檢查移液器是否已校準(zhǔn)以及移液器吸頭是否正確就位。
• 確保從凈 OD 中減去空白和 NSB 值。

高背景：

• 確保正確洗滌板。回顧上面的洗滌技術(shù)。
• 遵守所有孵化時(shí)間和溫度。高背景可能是由于孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或在高于推薦溫度的情況下孵育造成的。

 漂移

• 使用前將所有試劑置于室溫。
• 在運(yùn)行檢測(cè)之前或按照試劑盒說(shuō)明書(shū)中的指示準(zhǔn)備試劑。
• 避免中斷檢測(cè)設(shè)置。

邊緣效果

• 在環(huán)境條件下孵育板時(shí)，請(qǐng)注意溫度變化或通風(fēng)區(qū)域。將印版放在空調(diào)或暖氣通風(fēng)口下可能會(huì)導(dǎo)致顏色不均勻。

色彩發(fā)展

• 確保所有試劑以正確的體積和正確的時(shí)間添加到檢測(cè)中。堅(jiān)持正確的孵化時(shí)間。
• 除非試劑盒插頁(yè)中另有說(shuō)明，否則在加入終止溶液后立即讀取板。
• 底物是否正確準(zhǔn)備和添加

IHC 故障排除

 無(wú)染色

 高背景

非特異性染色